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植物蛋白跑电泳如何处理样品的

 楼主| 林夕 发表于 2019-7-17 10:29  
查看: 42427|回复: 1|
请各位大佬们帮忙解决一个问题,问题是:如何处理在做植物蛋白质的跑电泳的样品处理。我从植物提取清蛋白粉状后,在做跑电泳时不知道如何处理样品,请大家帮忙解决一些,在此表示感谢
植物蛋白跑电泳如何处理样品的
晓木虫晓木虫官方认证 发表于 2019-7-17 18:03  
双向电泳技术发展迅速,目前是蛋白质组学中应用最广泛的蛋白质分离手段。样本制备方法对于获得清晰度高的电泳结果至关重要,然而最佳的样本制备方法需要考虑样本特点及研究目的。 你是如何处理双向电泳样本的?分享一下你在双向电泳实验中成功或失败的经历。 荧光双向电泳DIGE做差异点分析的时候比考染好。 总蛋白的双向电泳,考染显色,跑出来的效果不太好,蛋白点不多,各点之间分得也不太开,我的上样量是不是偏少,第一向等点聚焦是不是不完全或者是样品不纯? 个人认为急需整理各种组织的高效的处理方法,酚抽法麻烦耗时有时效果却不见得比TCA丙酮好,着实让人郁闷。 植物组织样品处理一般情况下用简单的TCA/丙酮提取法或酚抽提法。如果提取蛋白的效果不佳,可用TCA/丙酮/酚抽提法 来提取蛋白。 双向电泳时,血清样本怎么处理比较好,听说很多种处理方法,但效果不太一样。 双向凝胶电泳的样品制备影响因素挺多的,包括蛋白质的溶解性、分子量、电荷数等等,我之前做实验的时候对于蛋白提取的marker是有要求的,marker需要根据目的基因及载体的分子量再来确定的。
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