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双向电泳技术发展迅速，目前是蛋白质组学中应用最广泛的蛋白质分离手段。样本制备方法对于获得清晰度高的电泳结果至关重要，然而最佳的样本制备方法需要考虑样本特点及研究目的。 你是如何处理双向电泳样本的？分享一下你在双向电泳实验中成功或失败的经历。 荧光双向电泳DIGE做差异点分析的时候比考染好。 总蛋白的双向电泳，考染显色，跑出来的效果不太好，蛋白点不多，各点之间分得也不太开，我的上样量是不是偏少，第一向等点聚焦是不是不完全或者是样品不纯？ 个人认为急需整理各种组织的高效的处理方法，酚抽法麻烦耗时有时效果却不见得比TCA丙酮好，着实让人郁闷。 植物组织样品处理一般情况下用简单的TCA/丙酮提取法或酚抽提法。如果提取蛋白的效果不佳，可用TCA/丙酮/酚抽提法 来提取蛋白。 双向电泳时，血清样本怎么处理比较好，听说很多种处理方法，但效果不太一样。 双向凝胶电泳的样品制备影响因素挺多的，包括蛋白质的溶解性、分子量、电荷数等等，我之前做实验的时候对于蛋白提取的marker是有要求的，marker需要根据目的基因及载体的分子量再来确定的。 |
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