求助帖，关于pod活性测定，求大神指教，在下拜谢！

面包 · 发表于 2016-5-23 23:36

本人在做毕业设计，课题为微波处理对跨荞麦种子萌发及酶活性影响。现阶段用愈创木酚法测定过氧化物酶（POD）出现了问题，希望各位指教一下。首先简单的介绍一下我的处理过程：取0.3克荞麦种子，用含有0.1mmol/lEDTA,4%PVP的PH7.8,0.05mol/l磷酸缓冲溶液（PBS），配以适量石英砂研磨，后经10000r/min,离心15分钟，的酶初提液。
测定过程：
4ml反应液（PH6.0,0.05mmol/lPBS,酶液1 ml，0.05mol/l愈创木酚） + 2%H2O2 1ml 混匀后立即于比色皿，测470nm处吸光度，每三十秒记录一次，记录4min,以缓冲溶液代替酶液作对照，以每分钟A470nm吸光度变化0.01为一个酶活单位。
疑问：但我测定4min内，每个样品吸光度变化不超过0.003，请问何处存在问题？如何改进为好？在下拜谢！！！
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jiangzehua · 发表于 2016-5-26 09:55

在提取时可以减少提取液，测酶活性时增加酶液体积。可以参考论文介绍的方法“我国大豆种皮过氧化物酶的酶活性及热稳定性研究”

面包 · 发表于 2016-5-26 11:10

jiangzehua 发表于 2016-5-26 09:55
在提取时可以减少提取液，测酶活性时增加酶液体积。可以参考论文介绍的方法“我国大豆种皮过氧化物酶的酶活 ...

多谢多谢

嘟嘟嘟 · 发表于 2016-9-29 02:20

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熙娅2014 · 发表于 2016-9-29 10:11

谢谢您的分享！

daluhaha · 发表于 2016-9-29 10:22

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1315194166 · 发表于 2016-9-29 10:39

大家都不容易！

doudou · 发表于 2016-9-29 11:43

好东西一定要看看！

xiaotangling · 发表于 2016-9-29 14:24

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昆吾慕南 · 发表于 2016-9-29 16:56

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Captain.TT · 发表于 2016-9-29 17:03

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昆吾慕南 · 发表于 2016-9-29 22:00

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cludyh · 发表于 2016-9-30 03:42

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男人、必自强 · 发表于 2016-9-30 05:21

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AE筱溪 · 发表于 2016-9-30 07:53

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Edison_yu · 发表于 2016-9-30 07:53

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小小柳叶 · 发表于 2016-9-30 11:48

大家都不容易！

你好岁月 · 发表于 2016-9-30 12:20

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晓木虫

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