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求助帖，关于POD活性测定，请大神指教，小生拜谢

摘要: 本人在做毕业设计，课题为微波处理对跨荞麦种子萌发及酶活性影响。现阶段用愈创木酚法测定过氧化物酶（POD）出现了问题，希望各位指教一下。 首先简单的介绍一 ...
        本人在做毕业设计，课题为微波处理对跨荞麦种子萌发及酶活性影响。现阶段用愈创木酚法测定过氧化物酶（POD）出现了问题，希望各位指教一下。    首先简单的介绍一下我的处理过程：取0.3克荞麦种子，用含有0.1mmol/lEDTA,4%PVP的PH7.8,0.05mol/l磷酸缓冲溶液（PBS），配以适量石英砂研磨，后经10000r/min,离心15分钟，的酶初提液。
    测定过程：
4ml反应液（PH6.0,0.05mmol/lPBS,酶液1 ml，0.05mol/l愈创木酚） + 2%H2O2 1ml   混匀后立即于比色皿，测470nm处吸光度，每三十秒记录一次，记录4min,以缓冲溶液代替酶液作对照，以每分钟A470nm吸光度变化0.01为一个酶活单位。
    疑问：但我测定4min内，每个样品吸光度变化不超过0.003，请问何处存在问题？如何改进为好？在下拜谢！！！
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