本帖最后由 一只虫子 于 2017-7-11 13:33 编辑
各位大侠，本人昨天从大鼠脾脏提取了细胞，我需要的是脾脏淋巴细胞，但是我不知道怎么鉴别我提出出来的细胞是否是淋巴细胞，请各位大侠不吝赐教。谢谢。
我的提取步骤如下：1.颈椎脱臼处死小鼠，用75%乙醇浸泡小鼠5min，沿腹腔中线剪开小鼠腹腔，取出脾脏置于培养皿中，
2、剪去脂肪和筋膜组织，用Hanks液漂洗。放入盛有冷的Hanks液5～10ml 的平皿中的200目筛网中，用注射器芯轻轻挤压, 使单个细胞经网进入溶液中。
3、将得到的细胞悬液置于离心管中，1500r/min离心10min。弃上层清液，加入2ml红细胞裂解液裂解红细胞，轻弹，室温静置15min，（若室温过低，37℃水浴）以除去红细胞，见离心后所得为白色沉淀上方只有一层红色膜为最佳状态，
4、用RPMI-1640培养液1000r/min离心10 min洗涤细胞3次，以除去剩余的氯化铵。将上述收集到的脾细胞置于培养瓶中，在37℃、5% CO2 培养箱培养2h，以除去贴壁细胞，收集未贴壁的细胞悬液即为脾淋巴细胞。
按照这个步骤来，但是在第3步骤：离心后所得为白色沉淀上方只有一层红色膜为最佳状态，没有出现一层红色膜，所以不知道收集到的是否为淋巴细胞。
求助怎么鉴别提取的细胞是否为淋巴细胞 |
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